光片顯微成像技術(shù)因其特異性標記及高靈敏度高對比度的成像,而受到廣泛地應用。光片熒光顯微鏡一種特殊的熒光顯微鏡,其提高了傳統熒光顯微鏡的三維成像速度,降低了光漂白以及光毒性,使得科學(xué)家們能夠長(cháng)時(shí)間地觀(guān)察生理狀況下組織細胞的生命活動(dòng),對生命科學(xué)的研究具有重要意義。 光片顯微成像常被哪些因素影響?
1、使用顯微鏡時(shí),被檢物體做的是否標準很重要。如:切片厚度是否太厚,蓋玻片是否符合國標等。
2、顯微鏡物鏡按檔次可分為約6-8個(gè)檔,常用的為平場(chǎng)消色差物鏡;如鏡頭檔次太低,則成像質(zhì)量會(huì )下降。因此,建議選擇平場(chǎng)以上檔次物鏡。
3、聚光鏡孔徑光欄,盡量和物鏡的數值孔徑相符,才能得到圖像分辨率。
4、調焦系統作為機械部分的重要部件,調焦精度也非常重要。對于生物學(xué)初學(xué)者或剛接觸顯微鏡的操作者,熟練的使用調焦系統,能快速找到圖像并聚焦,提高工作效率。
5、載物臺在觀(guān)察切片時(shí),常做X,Y的移動(dòng)。如雙層的機械移動(dòng)平臺,精度和穩定性較好,能在觀(guān)察顯微圖像時(shí)提供好的成像質(zhì)量。
6、非球面集光鏡能提供均勻的照明光線(xiàn),所觀(guān)察到的顯微圖像。
7、視場(chǎng)光欄應根據觀(guān)察不同的被檢物體和物鏡倍率開(kāi)啟到合適的位置,如開(kāi)得過(guò)大或過(guò)小顯微圖像的視場(chǎng)亮度會(huì )受到影響。
8、照明系統如采用溫度低,色溫較高的照明裝置,觀(guān)察到的是分辨率和銳利度高的顯微圖像。
9、采用照明系統,能調節光學(xué)的中心像,采用此系統,為鏡檢和數碼顯微成像系統,提供顯微照片。