BD FACS流式細胞儀

概述

BD FACSARIA III

BD FACSAria™ III 流式細胞儀具有諸多的技術(shù)，多色性能出色，其簡(jiǎn)便易用也為更多的科研工作者打開(kāi)了復雜的細胞分析的大門(mén)，成為流式的傳奇制作。其精心設計的液流和光路系統，實(shí)現了信號檢測的最da化。光膠耦合石英流動(dòng)池以及八角形、三角形光路收集系統，整個(gè)系統具有超高的靈敏度和分辨率。

特點(diǎn)

液流系統

多色分析及分選性能

BD FACSAria™ III細胞儀的液流系統是由壓力驅動(dòng)的。正向空氣壓力使樣本細胞通過(guò)光膠藕合的石英杯流動(dòng)池。在流體力學(xué)的聚焦作用下，樣本顆粒形成單一液流通過(guò)流動(dòng)池，在流動(dòng)池中，激光束與樣本流正交。

光膠耦合的石英杯流動(dòng)池

BD FACSAria III的核心部位是石英杯流動(dòng)池，她與激光器以及光膠耦合的熒光收集光路一起構成了一套真正的穩定性光路系統。為了得到更高的靈敏度，BD FACSAria III安裝了最新一代石英杯流動(dòng)池。它的設計幫助確保激光正好聚焦到樣本流上，這樣就可以產(chǎn)生zui強的信號，并收集到最多量的光信號。

穩定性光路使開(kāi)機啟動(dòng)時(shí)間最短，并提高實(shí)驗的可重復性，可以自動(dòng)化進(jìn)行每日質(zhì)控。更重要的是，它也提高了光信號收集效率，信號分辨率更好，特別適合多色應用的需求，甚至在高速分選時(shí)同樣具有光信號的高靈敏度和分辨率。

廣受贊譽(yù)的可靠性和易操作性是該系統的特性

除其他功能外，BD FACSAria III中最新一代流動(dòng)池的設計進(jìn)一步提高了側群細胞和細胞DNA周期分析的分辨率。

高性能分析，高性能分選

FACSAria III的分析性能，靈敏度，與最xin技術(shù)水平的分析型儀器的性能等同。這是因為其運用了與BD FACSCanto™ II和BD LSRFortessa™相同的光膠耦合流動(dòng)池設計和穩定性光路結構。

這種設計的光學(xué)結構可以達到高數值孔徑光學(xué)收集。流動(dòng)池和噴嘴的設計能夠使顆粒在分析區域降低流速以便收集最多光信號，之后顆粒在通過(guò)噴嘴后在液流中加速，從而進(jìn)行高性能細胞分選。

由于BD FACSAria III光學(xué)和液流系統的精密設計，與傳統的空氣激發(fā)系統在相同的分析和分選速度時(shí)進(jìn)行比較BD FACSAria III有更杰出光學(xué)檢測靈敏度。

噴嘴適應不同大小的顆粒

不同尺寸的噴嘴使用戶(hù)分選不同大小的樣本顆粒。噴嘴有四種尺寸可選:70微米、 85微米、 100微米和130微米。改進(jìn)的噴嘴設計使得更換更為方便，且安裝位置精確，不會(huì )發(fā)生偏差。這意味著(zhù)在每次插入噴嘴后，可以得到可重復的液滴形態(tài)，不需要重新調節儀器設置，使儀器具有可重復的設置和校正狀態(tài)。軟件中包括了不同噴嘴的特異分選設置，使壓力及分選設置與使用的噴嘴相匹配。

方便的無(wú)菌設置和清洗程序

液流系統的創(chuàng )新，如易于插拔的噴嘴，自動(dòng)化的分選設置，易于更換的濾光片等，使儀器設置更為方便和快捷。液流設計的特點(diǎn)包括一體化閥門(mén)組合和簡(jiǎn)易高效的液流管路。軟件向導使無(wú)菌分選設置更簡(jiǎn)便和高效。此外，在樣本運行后，樣本采集管內外都會(huì )自動(dòng)進(jìn)行沖洗，達到最小殘留，消除樣本間的交叉污染。

BD Accudrop技術(shù)簡(jiǎn)化了液滴延遲時(shí)間的確定

BD FACS™ Accudrop技術(shù)幫助使用者可以看到正確的最佳液滴延遲值，而在以前，這是無(wú)法用肉眼實(shí)現的。軟件自動(dòng)化操作，簡(jiǎn)化了液滴延遲的確定。一旦液滴延遲時(shí)間被確定，系統會(huì )自動(dòng)調節并維持恒定的斷點(diǎn)，此技術(shù)稱(chēng)為Sweet Spot。如果遇到管路堵塞，系統將自動(dòng)停止分選，并保護收集管。

顆粒經(jīng)過(guò)流動(dòng)池后液流會(huì )加速通過(guò)噴嘴，并形成分選液滴。因為顆粒的檢測在噴嘴上方，所以插入或移走噴嘴時(shí)，您都無(wú)需調整光路或液流。

光學(xué)特性

更高效的多色檢測

BD首chuang的在光學(xué)系統方面的革新設計能有效的最da化檢測信號，并在多色檢測中極大的提高每個(gè)顏色通道的靈敏度和分辨率。增強的靈敏度和分辨率意味著(zhù)即便信號很弱的細胞群也可以輕易地被識別和分選。

光學(xué)系統方便優(yōu)化多色檢測和抗體組合的設計，以求達到最佳結果。用戶(hù)可以選擇照射樣本細胞的激發(fā)光波長(cháng)，以及引導散射光和熒光信號通過(guò)特定的濾光片到達檢測器的收集光路。激發(fā)光和收集光路上的創(chuàng )新設計在減小激發(fā)光損失的同時(shí)，也顯著(zhù)改善了信號收集效率，從而使每個(gè)樣本都能獲取得到良好的信號。

激發(fā)光路

激發(fā)光路的組成包括:多根引導光纖、固定波長(cháng)的激光、光束整形裝置和消色差聚焦透鏡。各激光聚焦形成的光斑在空間上相互分離，并各自聚焦成形(9×65微米)。光斑聚焦越集中，熒光標記的微粒通過(guò)激發(fā)點(diǎn)時(shí)產(chǎn)生的信號就越強。光膠耦合的熒光收集物鏡能最大限度的將發(fā)射光從檢測點(diǎn)傳遞給熒光收集光路。由于光路和樣本流均固定，儀器光路的正交狀態(tài)在不同實(shí)驗、不同日期間一直保持不變。

杰出的靈敏度和分辨率

手動(dòng)調校光路會(huì )因為每次調校狀態(tài)不同而導致實(shí)驗結果有變化。而固定光路設計避免了這種問(wèn)題，保證儀器光路穩定，對實(shí)驗結果不會(huì )有影響。

八角形檢測器中的光傳播路徑

收集光路

光纖將發(fā)射光從光膠耦合石英杯傳遞給檢測器接受裝置?；诎私切魏腿切卧O計的收集光路，能最大限度的檢測來(lái)自每個(gè)激光束照射點(diǎn)的信號，其原理是讓波長(cháng)最長(cháng)的光(光子能力最di)優(yōu)先透射進(jìn)入第一個(gè)光電倍增管(PMT)，并通過(guò)一系列的長(cháng)通二色分光鏡將較短波長(cháng)的光反射到下一個(gè)PMT下檢測器。

這一設計是根據光反射比光透射更有效率這一原理。熒光信號以反射的形式傳播到每一個(gè)PMT下檢測器，并在到達檢測器之前只通過(guò)2個(gè)濾片。因此可以在光信號損失最小的情況下完成熒光檢測。

裝置在每個(gè)PMT下檢測器之前的帶通濾鏡允許波長(cháng)范圍內的熒光被收集。更重要的是，這種排列簡(jiǎn)化了光學(xué)陣列中濾鏡和分光鏡，濾光片更易更換，而且不需要任何校準就可達到更強的信號強度。

精密的光學(xué)設計

BD FACSAria III光學(xué)系統方面的諸多革新設計，例如專(zhuān)li的光膠耦合石英杯、八角形檢測器和9×65μm大小的光斑，這些革新設計協(xié)同工作，以最大限度提高檢測靈敏度和分辨率。通過(guò)精密的設計產(chǎn)生出這樣一套更高效的光學(xué)系統，使得其能夠使用較低功率激光，無(wú)需通過(guò)單純提高激光器的功率來(lái)提升實(shí)驗靈敏度和分辨率。而低功率激光又同時(shí)可以降低儀器運作的總體費用。

多色檢測

滿(mǎn)足當前及未來(lái)需求

對于許多用戶(hù)而言，一臺gao端流式細胞儀的性能高低取決于其靈活性，而靈活性主要表現在能夠同時(shí)檢測的參數數量。BD FACSAria™ III可以支持六根激光器和四個(gè)獨立光斑?？蛇x的激光器包括：633 nm, 561 nm, 488 nm, 445 nm, 405 nm和375nm。并具有同時(shí)進(jìn)行多達20個(gè)參數，18色的檢測能力，有著(zhù)強大的靈活性。

可升級并向下兼容

用戶(hù)可以根據當前和未來(lái)的需求以及預算情況來(lái)配置儀器。以后還可以通過(guò)升級服務(wù)來(lái)增加BD FACSAria III的激光器數量，以提升其能力。除此之外，BD FACSAria或者BD FACSAria II的用戶(hù)可以也通過(guò)升級服務(wù)獲得BD FACSAria III的新的功能。

方便日后升級，緊隨前沿技術(shù)

靈活設置你的 BD FACSAria III
最多同時(shí)安裝6個(gè)激光器，最高同時(shí)檢測18色，激光器可選:633, 561,488, 445, 405, 375 nm

更低的使用成本

與空氣中激發(fā)得分選方式相比，BD FACSAria III獨te高效的光學(xué)系統的設計使得使用成本降低。BD FACSAria III通過(guò)光纖來(lái)傳導固體激光器所發(fā)出的激光，從而實(shí)現了靈敏度和分辨率的最da化。

控制與分析

與其他BD流式細胞分析儀和分選儀完mei兼容

無(wú)論是BD FACSAria™ III的儀器設置、數據獲取或是數據分析，BD FACSDiva™軟件都能夠提供快捷有效的控制。BD FACSDiva軟件被廣泛地應用于一系列BD的流式細胞分析和分選儀，包括BDFACSCant,和BD™ LSR系統等。研究者的實(shí)驗設計更為靈活方便,可以將優(yōu)化好的實(shí)驗條件和設置快速的轉移到另一平臺上。例如，分析實(shí)驗的條件和設置可以輕松應用于分選實(shí)驗。

流式細胞儀的設置和追蹤

BD FACSDiva軟件具有儀器設置和追蹤(CS&T)功能，能夠幫助儀器完成基線(xiàn)設置，優(yōu)化儀器的靈敏度和熒光分辨率。從而大幅減少了由于操作者的主觀(guān)誤判帶來(lái)的結果錯誤，確保實(shí)驗結果的一致穩定。它使得用戶(hù)可以在儀器連續穩定的前提下快速完成特定實(shí)驗的條件設置。儀器狀態(tài)追蹤功能會(huì )監測一系列儀器設置的數值，并給出狀態(tài)報告，大大簡(jiǎn)化了日常質(zhì)控的流程。Levey-Jennings圖譜可以幫助用戶(hù)了解他們的儀器狀態(tài)確定是否需要進(jìn)一步的維護處理。

流式細胞儀的設置和追蹤

分選前的快速簡(jiǎn)單準備：
1. 打開(kāi)細胞儀
2. 開(kāi)啟液流
3. 自動(dòng)化完成儀器設置、質(zhì)控和液滴延遲優(yōu)化
4. 優(yōu)化樣品條件
5..分選開(kāi)始

數據獲取和分析

BD FACSDiva軟件使得科研工作者能夠使用自動(dòng)的數據獲取流程去完成多個(gè)數據的預覽和保存。軟件還能夠管理數據獲取模板、實(shí)驗界面設計、以及補償程序，方便數據獲取。

為了高效便捷的分析，軟件提供了自動(dòng)設門(mén)方式、用戶(hù)可選的圖形結構和批處理功能。存儲的數據可以通過(guò)圖形、門(mén)、群體層級以及統計結果，在同一張BD FACSDiva工作表上實(shí)現完整分析。一旦整體工作表被保存，可以被用來(lái)分析同一實(shí)驗中的多個(gè)樣本管數據，從而大大節省時(shí)間。有助于提高效率的方式還有：用戶(hù)自定義的批處理分析、自動(dòng)化的設門(mén)調整、在分析不同數據間暫停、輸出統計結果、在進(jìn)到下一個(gè)數據文件前打印結果等等。

數字化電子系統

光膠耦合的石英杯流動(dòng)室和電子處理系統協(xié)同作用下，每個(gè)檢測顆粒的信息最da化。電子采樣速率和顆粒在流動(dòng)室中的流動(dòng)速度精確匹配。每秒70,000個(gè)顆粒的上樣速度下，采集到的數據保證了線(xiàn)性度和精確性。

BD FACS流式細胞儀